高靈敏度ELISA試劑盒與常規(guī)ELISA試劑盒的區(qū)別

高靈敏度ELISA試劑盒，可對低于常規(guī)ELISA檢測限的低豐度檢測物實(shí)現(xiàn)定量分析。試劑盒設(shè)計基于酪胺信號放大技術(shù)。通過辣根過氧化物酶(HRP)催化顯色底物TMB，從而實(shí)現(xiàn)信號放大作用。
高靈敏度ELISA試劑盒的優(yōu)勢
●  高靈敏度 — 可檢測濃度≤ 1.0 pg/mL的細(xì)胞因子，結(jié)果可靠
●  樣本用量少 — 只需50ul,樣本量有*的*
●  操作簡單 — 試驗(yàn)流程簡單,試劑盒提供所有必需組分
●  檢測設(shè)備簡單 — 使用常規(guī)比色法酶標(biāo)儀(450nm)讀數(shù)即可

高靈敏度ELISA試劑盒與常規(guī)ELISA試劑盒的區(qū)別
高靈敏度( High Sensitivity ELISA)在傳統(tǒng)比色法的基礎(chǔ)上對獲得的信號進(jìn)行放大，從而實(shí)現(xiàn)對低表達(dá)水平蛋白的檢測。傳統(tǒng)夾心法ELISA僅利用生物素/鏈親和素-HRP系統(tǒng)對信號進(jìn)行擴(kuò)增放大，而高靈敏度ELISA則使用酪胺系統(tǒng)再次對信號進(jìn)行擴(kuò)增放大。生物素化酪胺(信號放大試劑)在HRP存在時， 會轉(zhuǎn)變?yōu)闃O富反應(yīng)活性的短壽命中間體。這些中間體可以與周圍蛋白共價結(jié)合而形成酪胺化復(fù)合物,因而提供了多個生物素結(jié)合位點(diǎn),可與更多鏈親和素-HRP分子結(jié)合。
●  參與反應(yīng)的生物素化酪胺總量與微孔中HRP的量成比例
●  經(jīng)孵育后，未結(jié)合的生物素化酪胺通過洗滌去除
●  洗滌去除未反應(yīng)的生物素化酪胺后，加入streptavidin-HRP (信號擴(kuò)增試劑 II) 與復(fù)合物的多個生物素位點(diǎn)結(jié)合。此放大步驟可有效增加zui終參與催化TMB底物的HRP分子數(shù)量